《葡萄酒中花青素的测定 液相色谱质谱/质谱法》团标征求意见

　　【仪表网 仪表标准】按照宁夏化学分析测试协会团体标准工作程序，标准起草组已完成《葡萄酒中花青素的测定 液相色谱质谱/质谱法》团体标准征求意见稿的编制工作。现按照宁夏化学分析测试协会《团体标准制修订程序》要求，公开征求意见。
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　　本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写》规定编写。起草单位有银川智慧食品安全检验检测中心(有限公司)、宁夏化学分析测试协会。
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　　本文件规定了葡萄酒中6种花青素含量的液相色谱质谱/质谱法。本文件适用葡萄酒中飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药素、锦葵素含量的测定和确证。
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　　方法原理：
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　　试样经乙醇-水的强酸溶液超声提取花色苷后，经沸水浴将花色苷水解成花青素，用液相色谱质谱/质谱法测定，外标法定量。
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　　仪器和设备：
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　　1.高效液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源(ESI)。2.分析天平：感量分别为0.01mg和0.01g。3.恒温水浴锅。4.超声波清洗器。
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　　标准溶液配制：
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　　1.标准储备溶液(100ug/mL): 分别准确称取各标准物1mg 到10mL 容量瓶中，用10%盐酸甲醇溶液溶解并定容，混合均匀得到100ug/mL 的单标标准储备液，贮存于棕色密闭玻璃瓶中，于-18℃下保存，有效期3个月。
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　　2.标准工作液：将单一标准储备液进行混合后，用10%盐酸甲醇溶液作为溶剂，并逐级稀释成0.5ng/mL、1.0ng/mL、10.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL。混合标准工作液现用现配。
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　　试样前处理：
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　　称取上述样品1.00g于50mL 具塞刻度试管中，用提取液定容至刻线，混匀1min 后，超声提取30min。超声提取后，于沸水浴中水解1h，取出冷却后，用提取液再次定容，静止，取上清液，用0.22μm水相滤膜过滤，待测。
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　　定量测定：
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　　根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的混合标准工作溶液，混合标准工作溶液和待测样液中 6 种花青素的响应值均应在仪器检测的线性范围内。混合标准工作溶液与样液等体积进样测定。标准溶液及样液均按 7.3.1 和 7.3.2 规定的条件进行测定，如果样液中与标准溶液相同的保留时间有色谱峰出现，则对其进行确证，飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药素、锦葵素的参考保留时间见表3。飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药素、锦葵素标准品的多反应监测(MRM)色谱图参见附录 A，采用标准曲线外标法定量。
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　　检出限及定量限：
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　　飞燕草色素、锦葵色素、矮牵牛色素检出限均为50.0g/kg、矢车菊色素、天竺葵色素、芍药素检出限均为25.0g/kg。